ব্যবহারিক নং-০৯ / টাইট্রেশন পদ্ধতির মাধ্যমে অ্যামাইনো অ্যাসিডের পরিমাণ নির্ণয়
টাইট্রেশন পদ্ধতির মাধ্যমে অ্যামাইনো অ্যাসিডের পরিমাণ নির্ণয়
মূলনীতি ঃ গ্লাইসিন অ্যামাইনো অ্যাসিডের কার্বক্সিল গ্রুপকে NaOH দ্বারা টাইট্রেশন করা যায়। এক্ষেত্রে অ্যামাইনো অ্যাসিডের উপস্থিত অ্যামাইনোগ্রুপ টাইট্রেশনের শেষ বিন্দুতে আসার ক্ষেত্রে বাধা সৃষ্টি করে।
এজন্য ফরম্যালডিহাইড (HCHO) ব্যবহার করা হয়, যা অ্যামাইনো গ্রুপের সাথে বিক্রিয়া করে অ্যামাইনো গ্রুপকে ব্লক করে দেয়। এরপর এই দ্রবণকে কেনাফথ্যালিন নির্দেশকের উপস্থিতিতে NaOH দ্বারা টাইট্রেশন করে অ্যামাইনো অ্যাসিডের পরিমাণ নির্ণয় করা যায়।
রাসায়নিক দ্রব্য :
১। অক্সালিক অ্যাসিড 0.1 N
২। সোডিয়াম হাইড্রোক্সাইড (NaOH) 0.1 N
৩। ফরম্যালডিহাইড (HCHO)
৪। ফেনাফথ্যালিন নির্দেশক
৫। অ্যামাইনো অ্যাসিড দ্রবণ।
প্রয়োজনীয় যন্ত্রপাতি ঃ
১। 100 ml আয়তনিক ফ্লাস্ক
২। কনিক্যাল ফ্লাস্ক
৩ । পিপেট
৪। বুৱেট
৫। বুয়েট স্ট্যান্ড
কার্যপ্রণালি :
NaOH Standerdization : 20 ml অক্সালিক অ্যাসিড একটি কনিক্যাল ফ্লাক্সে নিয়ে এতে কয়েক ফোটা ফেনফথ্যালিন যোগ করতে হবে।
একটি বুরেটে NaOH দ্রবণ নিয়ে তা ফোটায় ফোটায় কনিক্যাল ফ্লাঙ্কে যোগ করতে হবে। লক্ষ করতে হবে পিংকালার স্থায়ী হয়েছে কি না। পিং কালার স্থায়ী হলে NaOH যোগ বন্ধ করতে হবে। এবার বুরেট পাঠ নিতে হবে। এভাবে তিন বার করতে হবে।
অ্যামাইনো অ্যাসিডের পরিমাণ নির্ণয়:
অ্যামাইনো অ্যাসিডের Sample দ্রবণকে একটি 100 ml আয়তনিক ফ্লাস্কে নিয়ে তাতে পাতিত পানি যোগ করতে হবে 100 ml পূর্ণ হওয়া পর্যন্ত। এবার দ্রবণকে ভালোভাবে ঝাকাতে হবে যাতে দ্রবণটি ভালোভাবে পানির সাথে মিশে যায়।
এ দ্রবণ থেকে 20 ml প্রবণ একটি কনিক্যাল ফ্লাস্কে নিয়ে তাতে 5ml ফরম্যালডিহাইড (HCHO) যোগ করতে হবে এবং ২ মিনিট রেখে দিতে হবে। ১-২ ফোটা ফেনফথ্যালিন যোগ করতে হবে।
তারপর বুরেটে NaOH দ্রবণ নিয়ে তা ফোটায় ফোটায় কনিক্যাল ফ্রাঙ্কে যোগ করতে হবে। গাঢ় পিংক কালার আসলে যোগ বন্ধ করতে হবে এবং বুরেটের পাঠ নিতে হবে। এভাবে তিন বার করতে হবে।
ব্লাংক টাইট্রেশন ঃ
20 ml পাতিত পানি কনিক্যাল ফ্লাক্সে নিতে হবে এবং 5 ml HCHO যোগ করে কয়েক মিনিট রেখে দিতে হবে। কয়েক ফোটা ফেনফথ্যালিন যোগ করতে হবে। বুরেটে NaOH নিয়ে ফোটায় ফোটায় যোগ করতে হবে যতক্ষণ পর্যন্ত না পিংক কালার আসে। পিংক কালার আসলে NaOH যোগ করা বন্ধ করতে হবে।
১ম পর্যবেক্ষণ (NaOH এর Standerdization) :
হিসাব :
অক্সালিক অ্যাসিডের আয়তন, V = … ml
অক্সালিক অ্যাসিডের শক্তিমাত্রা N1 = … N
NaOH এর আয়তন, V2 = ….ml
NaOH এর শক্তিমাত্রা N2 = … N
সূত্র N1 V1 = N2V2
N2 = N2V2/N1
হিসাব ঃ
NaOH আয়তন (Test value, ২য় পর্যবেক্ষণ) = … ml
NaOH এর আয়তন (ব্ল্যাংক মান ৩য় পর্যবেক্ষণ = … ml
অ্যামাইনো অ্যাসিডের টাইট্রেশনে ব্যবহৃত NaOH (V2) = টেস্ট মান – ব্লাংক মান = … ml
অ্যামাইনো অ্যাসিডের পরিমাণ V1 = … ml
অ্যামাইনো অ্যাসিডের শক্তিমাত্রা N = … N
NaOH এর পরিমাণ, V2 = … ml
NaOH এর শক্তিমাত্রা N2 = … N
আরও পড়ূনঃ